微量高速离心机的注意事项及使用方法

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高速微量离心机特别适合高速微滤。一般转速是16000 r/min，容量比较小。采用微型无刷DC电机，升降速度快捷。

为了使微量高速离心机正常工作，应注意以下7点：

  1.机身应始终处于水平位置，外部电源系统的电压应匹配，并要求有良好的接地线。

  2.启动微型离心机前，检查转子是否安装牢固，是否有异物落入腔室。

  3.样品要提前平衡，使用离心筒时，离心筒和样品要同时平衡。

  4.离心挥发性或腐蚀性液体时，应使用带盖的离心管，并确保液体不会漏出，以免腐蚀机腔或造成事故。

  5.每次操作后，应做好使用记录，定期检修机器性能。

  6.轻轻擦拭微型离心机室，以免损坏室内的温度传感器。

  7.如果在离心过程中发现任何异常现象，应立即关闭电源，并报告相关技术人员进行维护。

下面简单介绍一下超速离心机的离心方法：

生物大分子和亚细胞物质离心分离的基本原理是根据它们在液体介质中的沉降速度不同或密度不同，停留在液体介质中的不同位置，逐一进行分离。前者是沉降速度法。使用该方法时，液体介质中zui的大密度小于样品中zui的小颗粒密度，离心选择高转速、短时间。后者是沉降平衡法。当使用这种方法时，液体介质的zui密度大于样品中小zui颗粒的密度，选择较低的转速和较长的时间进行离心。实际操作有几种形式：

1.差速离心

在这种方法中，选择不同的离心速度来分离不同的成分。比如先用大颗粒和上清液低速沉降，中颗粒沉降在高速离心上清液中，小颗粒沉降在zui后的超高速离心上清液中。通过逐步增加离心力来分离不同大小的颗粒。这种方法相对简单方便。分离出的成分下沉到管的底部，因此所需的成分可以快速浓缩，体积可以减小。然而，回收率和纯度之间存在矛盾。为了提高回收率，需要提高转速或延长离心时间，这样大小相似的颗粒也会沉入管底。因此，该方法多用于样品的粗纯化或初步浓缩。

2.速度区带离心(或速度梯度)

在这种方法中，样品被放置在连续的密度梯度液体上。通过离心，大颗粒快速沉降，小颗粒缓慢沉降。一段时间后，相同的粒子在相同的深度形成一个带，从而分离各种成分。适用于分离密度相同但大小不同的物质。例如，不同的蛋白质成分密度相似，但分子量不同，这种方法很容易分离。然而，要分离出密度不同、大小相似的物质并不容易。蔗糖梯度是一种常见的培养基。用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)制备梯度，用于梯度离心。然后在不同的区域分别收集每个组件。

3.沉降平衡离心 

这是一种静力学方法。离心管中形成液体梯度。在离心过程中，每种成分以不同的速度下沉，但zui最终保持与自身相同的密度，形成一个狭窄的平衡区，并保持相对稳定。为了使样品的所有成分达到平衡位置，需要长时间离心。这种方法适用于分离大小相似但密度不同的物质，如核酸。氯化铯梯度是平衡离心常用的介质，分辨率高，可以区分密度差为0.05的组分。然而，离心时间需要十到几十个小时，并且价格非常昂贵。现在有一种叫做“Percoll”的产品可以代替氯化铯梯度。该培养基能快速形成梯度，大大缩短离心时间至1-2小时，仍有良好的分离效果。并且有匹配的密度计来测量样品的密度。

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